Koja je svrha korištenja ddNTP-a?
Koja je svrha korištenja ddNTP-a?

Video: Koja je svrha korištenja ddNTP-a?

Video: Koja je svrha korištenja ddNTP-a?
Video: Электрический или водяной полотенцесушитель? Что выбрать? Установка. #25 2024, Studeni
Anonim

DdNTP odnosi se na Dideoksinukleotidi trifosfati koji se koriste u Sanger dideoxy metodi za proizvodnju različitih duljina lanaca DNA za sekvenciranje DNA. To rezultira prekidom procesa polimerizacije DNA (ili produljenja DNA), jer je za nastavak ovog procesa potrebna 3'-OH skupina.

Zbog toga, zašto se ddNTP koriste u sekvenciranju?

Dideoksinukleotidi su inhibitori DNA polimeraze koji produljuju lanac, korišteni u Sanger metodi za DNK sekvenciranje . Dideoksiribonukleotidi nemaju 3' hidroksilnu skupinu, stoga ne može doći do daljnjeg produljenja lanca kada je taj dideoksinukleotid na lancu. To može dovesti do prekida DNK slijed.

Slično, spajaju li se ddNTP-ovi na dNTP-ove? Jedan ili više od dNTP radioaktivno su označeni kako bi se vizualizirali proizvodi replikacije. Konačno, svaka cijev dobiva jedan od četiri posebna nukleotida tzv dideoksinukleotidi ( ddNTP ). Međutim, kada se jednom ugradi, DNA polimeraza ne može dalje produžiti lanac jer joj je za to potreban 3'-OH pričvrstiti do sljedećeg nukleotida.

Slično se može pitati, kako ddNTP zaustavljaju reakciju sekvenciranja?

Kada je prisutan u malim količinama u sekvenciranje reakcija , dideoksiribonukleozid trifosfati ( ddNTP ) prekinuti reakcija sekvenciranja na različitim pozicijama u rastućim lancima DNK. ddNTP zaustavlja reakciju sekvenciranja jer oni: uzrokuju da DNA polimeraza otpada s lanca šablona. c.

Koja tehnika koja uključuje dideoksinukleotide bi se mogla koristiti?

Sangerovo sekvenciranje je a metoda sekvenciranja DNA na temelju selektivne inkorporacije lanca koji završava dideoksinukleotidi pomoću DNA polimeraze tijekom in vitro replikacije DNA. Razvijen od strane Fredericka Sangera i kolega 1977. godine, bio je najrasprostranjeniji korišteni sekvenciranje metoda za otprilike 40 godina.

Preporučeni: