Kako Sanger DNA sekvenciranje funkcionira?
Kako Sanger DNA sekvenciranje funkcionira?

Video: Kako Sanger DNA sekvenciranje funkcionira?

Video: Kako Sanger DNA sekvenciranje funkcionira?
Video: 3 1 Основные понятия Секвенирование по Сэнгеру Basic concepts Sanger sequencing 2024, Studeni
Anonim

Sanger sekvenciranje rezultira stvaranjem produžetaka različitih duljina završenih dideoksinukleotidima na 3' kraju. Produženi produkti se zatim odvajaju kapilarnom elektroforezom ili CE. Molekule se ubrizgavaju električnom strujom u dugu staklenu kapilaru ispunjenu gel polimerom.

Na taj način, koja je Sangerova metoda sekvenciranja DNA?

Sanger sekvenciranje , poznat i kao prekid lanca metoda , je tehnika za DNK sekvenciranje temelji se na selektivnoj inkorporaciji dideoksinukleotida koji završavaju lanac (ddNTP) od strane DNK polimeraze tijekom in vitro DNK replikacija. Razvio ga je Frederick Sanger i kolege 1977. godine.

Također, kako funkcionira sekvenciranje završetka lanca? Sangerov DNK sekvenciranje je također poznat kao lanac - raskid metoda sekvenciranje . ddNTP -ovi rezultiraju raskid lanca DNA jer ddNTP nedostaje 3'-OH skupina potrebna za stvaranje fosfodiesterske veze između nukleotida. Bez ove veze, lanac od nukleotida koji nastaju je prekinuta.

Jednostavno, zašto radimo Sanger sekvenciranje?

Sanger sekvenciranje je a metoda od DNK sekvenciranje temelji se na selektivnoj inkorporaciji dideoksinukleotida koji završavaju lanac od strane DNK polimeraze tijekom in vitro DNK replikacija. Još uvijek ima prednost u odnosu na kratko čitanje sekvenciranje tehnologije (kao što je Illumina) da to limenka proizvoditi DNK sekvenca očitava> 500 nukleotida.

Je li Sangerova sekvenca točna?

Sanger sekvenciranje sa 99,99% točnost je "zlatni standard" za klinička istraživanja sekvenciranje . No, novije NGS tehnologije također postaju uobičajene u laboratorijima za klinička istraživanja zbog veće sposobnosti propusnosti i nižih troškova po uzorku.

Preporučeni: