Kako funkcionira Gibsonovo kloniranje?
Kako funkcionira Gibsonovo kloniranje?

Video: Kako funkcionira Gibsonovo kloniranje?

Video: Kako funkcionira Gibsonovo kloniranje?
Video: Kloniranje (sony vegas) 2024, Studeni
Anonim

The Gibsonovo kloniranje Master Mix se sastoji od tri različita enzima unutar jednog pufera. Svaki enzim ima specifičnu i jedinstvenu funkciju za reakciju: T5 egzonukleaza - stvara jednolančane DNA 3' prevjese žvakanjem s kraja DNA 5'. Komplementarni fragmenti DNK mogu se naknadno spojiti jedan s drugim.

S obzirom na to, kako Gibson radi?

The Gibson Assembly® metoda je postupak kloniranja koji omogućuje kloniranje dva ili više fragmenata bez potrebe za probavom restrikcijskim enzimom ili kompatibilnim restrikcijskim mjestima. Umjesto toga, korisnički definirani krajevi koji se preklapaju ugrađeni su u fragmente kako bi se omogućilo besprijekorno spajanje susjednih fragmenata.

Slično, što je u Gibson Assembly Master Mixu? The Gibsonov majstorski miks za kloniranje sastoji se od tri različita enzima unutar jednog pufera. Svaki enzim ima specifičnu i jedinstvenu funkciju za reakciju: T5 egzonukleaza - stvara jednolančane DNA 3' prevjese žvakanjem s kraja DNA 5'. Komplementarni fragmenti DNA mogu se naknadno spojiti jedan s drugim.

Na ovaj način, kako funkcionira montaža Golden Gatea?

Zlatna vrata kloniranje ili Montaža Golden Gatea je metoda molekularnog kloniranja koja omogućuje istraživaču da istovremeno i usmjereno sastavlja više fragmenata DNA u jedan komad pomoću restrikcijskih enzima tipa II i T4 DNA ligaze. Ovaj montaža je izvedena in vitro.

Kako funkcionira kloniranje Gatewaya?

The GATEWAY Kloniranje Tehnologija se temelji na sustavu rekombinacije specifičnog za mjesto koje koristi fag l za integraciju svoje DNA u E. AttL i attR mjesta koja okružuju umetnutu fagnu DNA rekombiniraju se specifično na mjestu tijekom događaja ekscizije kako bi reformirali mjesto attP u fagu l i attB mjesto u E.

Preporučeni: