Zašto se restrikcijski enzim ne bi smanjio?
Zašto se restrikcijski enzim ne bi smanjio?
Anonim

Može postojati nekoliko različitih razloga zašto vaš restrikcijski enzim ne reže DNK kako je prikazano u ovom videu. Priprema DNK za cijepanje trebao bi ne sadrže zagađivače kao što su fenol, kloroform, alkohol, EDTA, deterdženti ili prekomjerne soli, što sve može ometati restrikcijski enzim aktivnost.

U tom smislu, zašto restrikcijski enzimi ne režu bakterijsku DNK?

Bakterije imati restrikcijskim enzimima , također tzv restrikcijske endonukleaze , koji izrezati dvolančane DNK na određenim mjestima u fragmente. Zanimljivo, restrikcijskim enzimima ne cijepaju svoje DNK . Bakterije spriječiti svoje DNK od nasjeckati po restrikcijski enzim kroz metilaciju ograničenje stranice.

Netko se također može pitati, gdje se restrikcijski enzimi režu? Restrikcioni enzim Tipovi općenito, tip I enzimi rezati DNK na mjestima udaljenim od sekvence prepoznavanja; Tip II izrezati DNK unutar ili blizu sekvence prepoznavanja; Tip III izrezati DNA bliske sekvence prepoznavanja; i Tip IV cijepaju metiliranu DNK.

Slično, postavlja se pitanje što se događa ako dodate previše restriktivnog enzima?

Može doći do nepotpune probave kad previše ili isto malo enzim koristi se. The prisutnost kontaminanata u the DNK uzorak limenka inhibirati enzime , što također rezultira nepotpunom probavom. Neki restrikcijskim enzimima zahtijevaju kofaktore za punu aktivnost.

Zašto moj sažetak ograničenja ne radi?

Nepotpuno ili ne digestija zbog aktivnosti enzima blokirane metilacijom DNA. Ako je vaš enzim aktivan i probavlja kontrolirati DNK i the reakcija je postavljena uz optimalne uvjete, ali još uvijek vidite pitanja s digestija , možda je zato the enzim se inhibira metilacijom the šablon DNK.

Preporučeni: