Sadržaj:

Kako umetnuti gen u plazmid?
Kako umetnuti gen u plazmid?

Video: Kako umetnuti gen u plazmid?

Video: Kako umetnuti gen u plazmid?
Video: Плазмиды Бактерий 2024, Studeni
Anonim

Osnovni koraci su:

  1. Otvorite plazmid i "zalijepi" u gen . Ovaj proces se oslanja na restrikcijske enzime (koji režu DNK) i DNA ligazu (koja spaja DNK).
  2. Umetnuti the plazmid u bakterije.
  3. Odrasti puno plazmid -nose bakterije i koriste ih kao "tvornice" za proizvodnju proteina.

Također, kako se gen može umetnuti u plazmid GCSE?

to je umetnuta u plazmid pomoću enzima ligaze. the plazmid ide u bakterijska stanica. transgena bakterija se razmnožava, što rezultira u milijuni identičnih bakterija koje proizvode ljudski inzulin.

Osim toga, kako subklonirati gen? Osnovni koraci za Subkloniranje Oslobađate i pročišćavate svoj umetak iz roditeljskog vektora, ligirate ovaj umetak u pripremljeni odredišni vektor, transformirate ovu vezu ligacije u kompetentne bakterijske stanice. Zatim pregledate transformirane ćelije za umetak.

Imajući to u vidu, koja su 4 koraka kloniranja gena?

U klasičnim restrikcijskim enzimskim protokolima za probavu i kloniranje ligacijom, kloniranje bilo kojeg fragmenta DNA u biti uključuje četiri koraka:

  • izolacija DNK od interesa (ili ciljne DNK),
  • podvezivanje,
  • transfekcija (ili transformacija), i.
  • postupak probira/selekcije.

Kako pojačati plazmid?

Eksperimentalna procedura

  1. Pokrenite PCR i pročistite PCR proizvod: Pokrenite PCR da pojačate svoj umetnuti DNA.
  2. Probavite svoj DNK:
  3. Izolirajte svoj umetak i vektor pročišćavanjem gela:
  4. Povežite svoj umetak u svoj vektor:
  5. transformacija:
  6. Izolirajte gotov plazmid:
  7. Provjerite svoj plazmid sekvenciranjem:

Preporučeni: